环氧化物酶抑制剂NS-398联合奥沙利铂对宫颈癌HeLa细胞生长抑制及诱导凋亡作用的研究

目的 研究环氧化酶抑制剂NS-398联用奥沙利铂(L-OHP)对宫颈癌HeLa细胞的抑制及诱导凋亡作用.方法 体外培养人宫颈癌HeLa细胞,CCK-8法检测不同浓度NS-398(0、30、60μmol/L),L-OHP(0.0、2.5、5.0、10.0 mg/L)单独作用及联合作用于HeLa细胞后对细胞的抑制作用;将HeLa细胞随机分为:对照组、NS-398组(60μmol/L)、L-OHP组(10 mg/L)及联合组(NS-39860μmol/L+L-OHP 10 mg/L),倒置显微镜观察HeLa细胞形态改变,罗丹明染色观察HeLa细胞凋亡情况,流式细胞仪检测HeLa细胞早期凋亡率,DNA琼脂糖凝胶电泳检测梯状条带.结果 CCK-8结果显示,与未加药物组比较,NS-398单药组和L-OHP单药组抑制率增高;联合组抑制率高于NS-398单药组和L-OHP单药组(均P<0.01).对照组细胞状态良好,形态呈梭形,贴壁生长,细胞边缘清晰,胞膜完整.NS-398组细胞体积皱缩变小变圆,胞质内出现颗粒状物质,少量细胞从瓶底脱落,漂浮于培养液中.L-OHP组细胞失去正常形态,皱缩变小,培养液中可见死细胞.联合组培养液中可见大量死细胞和细胞碎片,仅余少量细胞贴在瓶底,且形态呈不同程度的皱缩,部分细胞破裂,细胞内容物溢出.罗丹明123染色结果显示,对照组无荧光;NS-398组、L-OHP组与联合组荧光强度增强,尤其以联合组最为明显.流式细胞仪检测结果显示,NS-398组和L-OHP组凋亡率明显高于对照组;联合组凋亡率明显高于NS-398组、L-OHP组(均P<0.01).DNA电泳显示,联合组出现了明显的梯状条带,NS-398组和L-OHP组有明显的弥散现象出现;对照组即无弥散现象也无梯状条带出现.结论 NS-398能够增强L-OHP对HeLa细胞的生长抑制作用和诱导凋亡作用.