雷公藤甲素对人骨肉瘤细胞阿霉素耐药株的逆转作用及机制研究

目的:探讨雷公藤甲素(TPL)体外给药对人骨肉瘤细胞阿霉素(ADR)耐药株(U2 OS/ADR)多药耐药(MDR)的逆转作用及可能机制.方法:使用人骨肉瘤细胞株U2 OS,利用浓度递增法建立耐药骨肉瘤细胞U2 OS/ADR模型.设置空白组、对照组、TPL组和维拉帕米阳性对照组(VER组).CCK-8法测定TPL处理对U2OS/ADR细胞增殖和ADR敏感性的影响.以罗丹明123(Rh123)作为内标,采用流式细胞术评估细胞P-糖蛋白(P-gp)外排作用.实时定量PCR(qRT-PCR)检测TPL对MDR1基因转录的影响.Western blot检测TPL对磷酸化磷酸肌醇-3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、MDR1和肺耐药相关蛋白(LRP)表达的影响.结果:与对照组相比,TPL组使ADR对U2OS/ADR细胞生长的抑制作用提高(P<0.05).TPL组Rh123阳性信号计数高于对照组(P<0.001).与对照组相比,TPL组MDR1、LRP、p-PI3K和p-AKT蛋白表达水平及MDR1基因mRNA水平下降(均P<0.05).结论:TPL具有抑制U2OS/ADR细胞生长、提高U2OS对ADR敏感性的作用,其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路活化、下调U2OS/ADR细胞MDR1和LRP基因表达、抑制P-gp对细胞毒物质的外排有关.