基于蛋白质组学分析侧脑室微量注射GnIH对下丘脑蛋白的调节作用

目的 观察侧脑室微量注射促性腺激素抑制激素(GnIH)对下丘脑蛋白质的调节作用.方法 构建卵巢摘除术补充雌激素(OEP)大鼠模型(n=30),随机分为实验组和对照组各15只,侧脑室分别微量注射等量GnIH和生理盐水.给药6 h后取下丘脑,制备蛋白样品.应用液相色谱—串联质谱(LC-MS/MS)技术联合生物信息学分析工具[Omicsbean、基因本体论(GO)和京都蛋白与蛋白组百科全书(KEGG)]分析下丘脑蛋白质组分和差异蛋白质的分布、功能及作用机制.应用UALCAN数据库中CPTAC分析程序,分析关键蛋白在激素相关性肿瘤的表达情况.体外培养激素依赖性乳腺癌细胞系MCF-7,运用蛋白印迹检测关键蛋白的表达.结果 鉴定出253个差异表达蛋白,其中129个蛋白上调,124个蛋白下调.GO结果显示,差异蛋白的生物过程主要在单体代谢过程和小分子代谢过程中富集,细胞成分主要分布在细胞质和细胞核,分子功能主要涉及小分子结合功能.KEGG结果显示,差异蛋白参与了代谢途径、糖酵解/糖异生、内分泌和其他因子调节的钙重吸收等10条重要信号通路.Omicsbean软件可视化蛋白—蛋白相互作用分析显示:关键蛋白GALM、ADPGK、PGM1、PFKL上调,ALDH2下调.CPTAC分析显示,关键蛋白GALM、ADPGK、PGM1、PFKL和ALDH2在乳腺癌中的表达高于正常乳腺组织.蛋白印迹结果显示,ADPGK在MCF-7表达下调.结论 侧脑室微量注射GnIH后可引起OEP大鼠下丘脑蛋白的差异变化.