Let-7f-5p对糖尿病大鼠心肌微血管病变的影响及机制

目的 探讨微小RNA(miRNA)Let-7f-5p在糖尿病大鼠心肌微血管病变中的作用及机制.方法 将25只SD雄性大鼠随机分为正常对照组5只和模型组20只,正常对照组给予普通饲料喂养;模型组给予高脂高糖饲料喂养4周后,一次性腹腔注射链脲佐菌素制作糖尿病模型.取造模成功的15只大鼠,随机分为空病毒组、Let-7f-5p过表达组、Let-7f-5p抑表达组各5只,Let-7f-5p过表达组、Let-7f-5p抑表达组分别尾静脉一次性注射Let-7f-5p过表达病毒原液50μL、Let-7f-5p抑制表达病毒原液50μL;空病毒组尾静脉一次性注射等体积空病毒原液.继续高脂高糖饲料喂养12周,诱导糖尿病心肌微血管病变.所有大鼠麻醉,使用彩色多普勒超声显像仪记录左心室舒张末期内径(LVIDd)、左心室收缩末内径(LVIDs)、左心室射血分数(LVEF)、左心室缩短分数(FS).取心肌组织,免疫组化标记心肌微血管数目,计算毛细血管数量/心肌细胞核比值(C/M)用于评估心肌微血管密度;RT-PCR法检测Let-7f-5p及Argonaute蛋白1(AGO1)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达,Western blotting法检测AGO1、VEGF蛋白表达.结果 与对照组比较,空病毒组LVIDd、LVIDs、LVEF、FS均降低(P均<0.05);C/M降低(P均<0.05);心肌组织Let-7f-5p mRNA表达降低,AGO1 mRNA及蛋白表达增加,VEGF mRNA和蛋白表达降低(P均<0.05).与空病毒组比较,Let-7f-5p过表达组LVIDd、LVIDs、LVEF、FS均升高(P均<0.05);C/M升高(P均<0.05);心肌组织Let-7f-5p mRNA表达升高,AGO1 mRNA及蛋白表达降低,VEGF mRNA和蛋白表达升高(P均<0.05).与空病毒组比较,Let-7f-5p抑表达组LVIDd、LVIDs、LVEF、FS均降低(P均<0.05);C/M降低(P均<0.05);心肌组织Let-7f-5p mRNA表达减少,AGO1 mRNA及蛋白表达增加,VEGF mRNA和蛋白表达降低(P均<0.05).结论 糖尿病大鼠心肌微血管密度降低,心脏收缩功能受损.上调Let-7f-5p表达可能通过Let-7/AGO1/VEGF信号通路增加心肌微血管密度,改善心脏功能;下调Let-7f-5p表达可导致心肌微血管病变加重,心功能恶化.