血管紧张素-(1-7)及丝裂原活化蛋白激酶激酶抑制剂U0126对血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠右心室心肌成纤维细胞增殖的影响

目的通过大鼠右心室心肌成纤维细胞(RVCFs)体外培养,探讨血管紧张素(Ang)-(1-7)及丝裂原活化蛋白激酶激酶抑制剂U0126对Angll诱导的RVCFs的影响.方法提取乳大鼠RVCFs,经过抗波形蛋白免疫荧光法鉴定,传代培养至第3代,随机分为对照组、Ang II组、Ang-(1-7)组(分为低、中、高剂量组)、U0126组(分为低、中、高剂量组).采用噻唑蓝比色法测定各组细胞增殖情况;蛋白质印迹法检测各组I型胶原蛋白αl(COLIAl)表达水平;免疫组织化学法测定转化生长因子β1(TGF-β1)表达水平.结果Ang II组RVCFs的细胞增殖率明显高于对照组[(141.7 ± 9.6)％比(100.0 ± 0.0)％],Ang-(l-7)低、中、高剂量组,U0126低、中、高剂量组RVCFs的细胞增殖率[(118.2 ±4.9)％、(52.1 ± 5.9)％、(43.6 ±2.5)％,(43.0±2.3)％、(43.3 ±3.7)％、(49.4 ±4.6)％]均显著低于Angll组(均P<0.05),且Ang-(l-7)对RVCFs增殖的抑制作用呈剂量反应关系.Ang Ⅱ能促进RVCFs COL1A1表达,Ang-(1-7)及U0126对Ang II诱导的COL1A1表达均有抑制作用.TGF-β1免疫组化阳性反应分级示对照组(+)、Ang11组(+++)、Ang-(l-7)组(++)、U0126组(+).结论 Ang-(1-7)、U0126可部分抵消Angll刺激导致的RVCFs 增殖,抑制TGF-β1和COL1Al的蛋白表达.