丙泊酚调控长链非编码RNA同源框基因反义RNA2对肾癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨丙泊酚对肾癌细胞生物学行为的影响及其潜在机制.方法 以正常培养的人肾癌786-O细胞为对照组,用含2、5、10 mg/L丙泊酚的RPMI 1640培养液孵育的786-O细胞为2、5、10 mg/L丙泊酚组.应用细胞计数试剂盒法检测4组细胞活力,应用平板克隆实验检测4组细胞克隆形成能力,应用流式细胞仪检测4组细胞凋亡情况,应用Transwell实验检测4组细胞迁移和侵袭情况,应用实时定量聚合酶链反应法检测4组细胞同源框基因反义RNA2 (HOXA-AS2)的表达,应用蛋白质印迹法检测B细胞淋巴瘤2家族蛋白(Bcl-2)和Bcl相关X蛋白(Bax)的表达情况.786-O细胞分别转染si-HOXA-AS2、si-NC、pcDNA-HOXA-AS2(si-HOXA-AS2组、si-NC组、pcDNA-HOXA-AS2组),用含10 mg/L丙泊酚的RPMI 1640培养液孵育转染pcDNA-HOXA-AS2细胞(丙泊酚+pcDNA-HOXA-AS2组),分别采用上述方法检测786-O细胞的活力、克隆形成、凋亡、迁移和侵袭能力.结果 2、5、10 mg/L丙泊酚组786-O细胞的吸光度值、克隆形成数、Bcl-2蛋白、HOXA-AS2的表达水平均显著低于对照组,细胞迁移数、侵袭数均显著少于对照组,凋亡率、Bax蛋白表达均显著多于对照组(均P＜0.05).随着丙泊酚浓度的增加,其对786-O细胞的吸光度值、克隆形成数、Bcl-2蛋白、HOXA-AS2表达以及细胞迁移和侵袭的抑制作用逐渐增强,对细胞凋亡、Bax蛋白表达的促进作用逐渐增强(均P ＜0.05).si-HOXA-AS2组786-O细胞的吸光度值、克隆形成数、迁移数、侵袭数、Bcl-2蛋白和HOXA-AS2表达量均显著低于si-NC组,凋亡率、Bax蛋白表达量均显著高于si-NC组(均P ＜0.05).丙泊酚+pcDNA-HOXA-AS2组786-O细胞HOXA-AS2的表达、吸光度值、克隆形成数、Bcl-2蛋白表达显著高于10 mg/L丙泊酚组[(0.840±0.079)比(0.153±0.017)、(0.77±0.04)比(0.33±0.03)、(98.0±2.4)比(40.7±2.0)、(0.623±0.037)比(0.173±0.012)],细胞迁移数、侵袭数显著多于10 mg/L丙泊酚组[(145.7±7.6)个比(77.0±2.8)个、(116.3±3.7)个比(47.7±2.5)个],凋亡率、Bax蛋白表达显著低于10 mg/L丙泊酚组[(11.25±0.69)％比(24.79±0.99)％、(0.300±0.029)比(0.820±0.071)](均P＜0.05).结论 丙泊酚通过下调lncRNA HOXA-AS2的表达抑制肾癌细胞增殖、迁移和侵袭,并诱导细胞凋亡.