LncRNA MEG3表达量与脂多糖诱导支气管上皮细胞增殖及凋亡和炎症因子分泌的关系

目的 探讨长链非编码RNA母系表达基因3(LncRNAMEG3)对脂多糖(LPS)诱导的支气管上皮细胞增殖、凋亡及炎症因子分泌的影响.方法 体外培养支气管上皮细胞16HBE,LPS处理16HBE细胞建立炎症损伤模型.采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测白细胞介素-8(IL-8)与白细胞介素-1β(IL-1β)的含量;甲基噻唑基四唑(MTT)检测细胞增殖率;流式细胞术检测细胞凋亡率;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测LPS诱导的16HBE细胞中MEG3的表达水平.取对数生长期支气管上皮细胞,用50μg/mL的LPS处理细胞24 h作为LPS组,正常培养的细胞作为NC组,将Si-MEG3、Si-con、pcDNA-MEG3、pcDNA转染主支气管上皮细胞48 h,随后使用50 μg/mL的LPS处理细胞24 h,分别命名为LPS+si-MEG3组、LPS+si-con组、LPS+pcDNA-MEG3组、LPS+pcDNA组.通过MTT与流式细胞术检测细胞增殖能力及凋亡能力的改变;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved caspase-3)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Cleaved caspase-9)、细胞周期蛋白1(CyclinDl)的蛋白表达量.结果 与NC组相比,LPS组IL-8、IL-1β水平、细胞凋亡率及Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9蛋白的表达水平均显著升高(P＜0.05),细胞增殖率及CyclinDl蛋白、MEG3的表达水平均显著降低(P＜0.05);干扰MEG3表达可促进LPS诱导的支气管上皮细胞凋亡及抑制细胞增殖,与LPS+si-con组相比,LPS+si-MEG3组支气管上皮细胞中MEG3的表达水平、细胞增殖率、CyclinDl蛋白相对表达量显著降低(P＜0.05),IL-8、IL-1β水平、细胞凋亡率、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9蛋白相对表达量显著升高(P＜(.05);与LPS+pcDNA 组相比,LPS+pcDNA-MEG3组支气管上皮细胞中IL-8、IL-lβ水平、细胞凋亡率及Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9蛋白的相对表达水平均显著降低(P＜0.05),MEG3的表达水平、细胞增殖率及CyclinDl的表达水平均显著升高(均P＜0.05).结论 LncRNA MEG3过表达能够促进LPS诱导的支气管上皮细胞增殖,抑制细胞凋亡,减少炎症因子分泌.