通过抑制蛋白质二硫键异构酶P4HB阻断NK细胞活化的研究

目的 探究蛋白质二硫键异构酶脯氨酰-4-羟化酶β亚基(P4HB)在自然杀伤细胞(NK)活化中的功能.方法 NK细胞在无血清和细胞因子的培养基中培养12 h后,白细胞介素(IL)-2、IL-12和IL-18联合刺激4 h,利用蛋白印迹检测P4HB的表达水平;将不同终浓度的P4HB特异性抑制剂bacitracin作用于原代NK细胞以及NK细胞系(N16),ELISA检测NK细胞的干扰素-γ(IFN-γ)分泌水平,流式细胞术(FACS)检测P4HB抑制剂对NK细胞杀伤K562细胞的影响;不同终浓度P4HB抑制剂预处理NK细胞后,与CD20抗体孵育,利用双荧光素酶报告系统检测其对Daudi-Luc细胞的杀伤作用.结果 NK细胞活化时P4HB表达水平升高,抑制P4HB可降低NK细胞IFN-γ分泌水平并可减弱其对K562细胞的杀伤以及抗体依赖的细胞毒(ADCC)作用.结论 蛋白质二硫键异构酶P4HB在NK细胞活化过程中发挥着重要作用.