重组Tβ4②分离纯化条件的优化及实验室研究工艺的确定

优化重组蛋白Tβ4②的纯化条件,最终获得纯度大于98％的具有生物活性的Tβ4②,为后续研究奠定基础.采用单因素试验,研究裂解液体积、裂菌方法、超声功率、硫酸铵饱和度等对重组蛋白纯化的影响,确定最佳的裂解方法和硫酸铵饱和度;通过对Tβ4②蛋白理化性质的预测,确定最佳的层析方案.采用1:7的菌体与裂解液体积比,45％的超声功率或高压匀浆技术,50％的硫酸铵饱和度作为粗提纯的最佳条件,并通过疏水作用层析分离获得了纯度大于98％的重组蛋白.该研究优化了重组蛋白Tβ4②的纯化条件,最终获得了纯度大于98％的重组蛋白,蛋白回收率为(0.26±0.02)％,且与Tβ4单体相比,Tβ4②可以明显促进内皮细胞的迁移.