H1受体拮抗剂异丙嗪对顺铂治疗骨肉瘤的影响及机制

目的 观察异丙嗪在骨肉瘤细胞对顺铂化疗敏感性的影响,探讨其用于替代地塞米松(Dex)作为化疗辅助药物的可行性.方法 构建荷人骨肉瘤裸鼠模型,随机分成6组,每组6只.分别腹腔注射200 μL的生理盐水、化疗药物顺铂(3mg/kg)、Dex(4mg/kg)、异丙嗪(20mg/kg)、Dex+顺铂、异丙嗪+顺铂治疗.每隔3天给药1次,共4次.定期测量肿瘤体积大小,至第15天麻醉处死小鼠取肿瘤组织,称量瘤体重量.免疫荧光染色法检测肿瘤组织中血管内皮细胞标志物CD31的表达和分布;观察上述不同药物处理对骨肉瘤细胞株MG-63细胞血管内皮细胞生长因子VEGF表达和分泌的影响;MTT法检测MG63的增殖及顺铂诱导的增殖抑制作用;用Annexin V-FITC/PI双染法检测异丙嗪和顺铂对MG-63细胞凋亡的影响.结果 与单用顺铂治疗组相比,异丙嗪+顺铂组与Dex+顺铂组的肿瘤体积和离体瘤重均显著增大.Dex+顺铂组和异丙嗪+顺铂组肿瘤间质组织中CD31的表达和分布明显多于单用顺铂组.单用Dex或异丙嗪处理24 h或36 h并不改变VEGF mRNA和蛋白分泌水平,单用顺铂处理则可明显降低VEGF的表达和分泌,而异丙嗪与顺铂联用则可显著逆转顺铂的作用.10nM～10μM异丙嗪处理MG63细胞72h,仅10 nM异丙嗪对细胞增殖抑制作用,抑制率约为25.7％;与2μg/mL顺铂联用时,异丙嗪也不能逆转顺铂对细胞增殖抑制作用.联用Dex可以部分逆转顺铂导致的细胞凋亡,凋亡率为12.7％,而联用异丙嗪并不能减少顺铂对细胞的凋亡诱导作用.结论 骨肉瘤化疗时使用H1受体拮抗剂异丙嗪会降低化疗药的效果,机制可能与异丙嗪促进肿瘤血管生成有关.