DUSP6在TGF-β2诱导的晶状体上皮细胞间质转分化及细胞外基质合成中的作用

目的 探讨双特异性磷酸酶6(dual-specificity phosphatase 6,DUSP6)在转化生长因子β2(transforming growth factorβ2,TGF-β2)诱导的人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLECs)上皮间质转分化(epithelial mesenchymal transition,EMT)及细胞外基质(extracellular matrix,ECM)合成的调控作用.方法 用10μg/L TGF-β2处理晶状体上皮B3(HLE-B3)细胞株不同时间(0、12、24、48 h)后,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹(Western blotting)方法检测DUSP6、EMT标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)以及ECM主要成分纤维连接蛋白(fibronectin,Fn)的表达.构建DUSP6过表达载体并转染HLE-B3细胞株后,加10μg/L TGF-β2处理24 h,分为3组:TGF-β2组、空载体(empty vector,EV)+TGF-β2组、DUSP6+TGF-β2组.RT-qPCR和Western blotting检测DUSP6过表达对α-SMA、Fn表达的影响,划痕实验和Transwell迁移实验用于评估DUSP6过表达对细胞迁移的作用.结果 与对照组相比,10μg/L TGF-β2处理24 h时DUSP6 mRNA及蛋白表达均减少(P<0.05).与EV+TGF-β2组相比,DUSP6+TGF-β2组抑制了α-SMA和Fn的表达与细胞迁移(P<0.05).结论 DUSP6能够抑制TGF-β2引起的晶状体上皮细胞EMT及ECM合成,靶向DUSP6可能为后发性白内障提供一种潜在的治疗策略.