骨碎补总黄酮对大鼠骨髓间充质干细胞倍增反应和分化的作用机制实验

背景 骨碎补总黄酮(total?flavonoids?of?rhizome?drynariae,TFRD)是骨碎补的主要活性成分,近年来许多研究表明TFRD可有效提高骨质疏松症患者骨密度,进而促进骨愈合,但目前其作用的具体分子机制尚不完全明确.目的 探讨TFRD对大鼠骨髓间充质干细胞(bone?marrow?mesenchymal?stem?cells,BMSCs)倍增反应和分化作用的分子机制.方法 获取SD大鼠的骨髓间充质干细胞.细胞培养基中加入TFRD,根据TFRD浓度的不同分为低浓度组(TFRD?0.1?mg/L)、中浓度组(TFRD?1.0?mg/L)、高浓度组(TFRD?10.0?mg/L),细胞培养基中未加入TFRD的作为对照组.采用CCK8法检测各组BMSCs细胞增殖情况,茜素红染色法检测各组成骨分化情况,RT-PCR法和Western?blot法检测中浓度组与对照组β-catenin、RunX2、PPARG的mRNA和蛋白表达情况.结果 不同时间点低浓度、中浓度、高浓度TFRD组吸光度值与对照组比较均显著升高(P<0.05);4组矿化结节数统计,中浓度组高于其他三组,差异有统计学意义(P<0.05);中浓度组与对照组比较,β-catenin和RunX2?mRNA表达明显升高,PPARG?mRNA表达明显降低(P<0.05);中浓度组与对照组比较,β-catenin和RunX2蛋白表达明显升高,PPARG蛋白表达明显降低(P<0.05).结论 TFRD可促进BMSCs细胞增殖和成骨分化,其作用机制可能与上调β-catenin、RunX2表达,抑制PPARG表达有关.