没食子酸对M1型巨噬细胞极化的影响

目的:体外建立M1型巨噬细胞极化模型,探讨没食子酸(GA)对M1型巨噬细胞极化的影响.方法:选用8周龄C57BL/6雌性小鼠,取腹腔巨噬细胞进行体外原代培养,通过对细胞培养基进行不同的处理,将实验分为对照组(不做处理)、M1极化模型组[加入脂多糖(LPS,100μg·L-1)和干扰素γ(IFN-γ,20μg·L-1)诱导腹腔巨噬细胞M1型极化]和GA组[在M1极化模型组的基础上,加入GA(37.5 mg·L-1)与LPS和IFN-γ共处理腹腔巨噬细胞].采用倒置显微镜观察细胞形态表现,AnnexinⅤ-PE/7-AAD双染法检测各组细胞凋亡率,流式细胞术检测F4/80+iNOS+M1型巨噬细胞阳性表达率,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和白细胞介素1β(IL-1β)mRNA表达水平.结果:倒置显微镜观察,对照组细胞主要呈圆形或椭圆形,M1极化模型组细胞主要表现为梭形;与M1极化模型组比较,GA组可见梭形细胞减少,圆形细胞增多.3组巨噬细胞凋亡率比较差异无统计学意义(P>0.05).与对照组比较,M1极化模型组中F4/80+iNOS+M1型巨噬细胞阳性表达率升高(P<0.01),GA组中F4/80+iNOS+M1型巨噬细胞阳性表达率升高,但差异无统计学意义(P>0.05);与M1极化模型组比较,GA组中F4/80+iNOS+M1型巨噬细胞阳性表达率明显降低(P<0.01).与对照组比较,M1极化模型组细胞中iNOS和IL-1βmRNA表达水平升高(P<0.01);与M1极化模型组比较,GA组iNOS和IL-1βmRNA表达水平明显降低(P<0.01),与对照组比较,GA组iNOS和IL-1βmRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05).结论:GA对巨噬细胞凋亡无明显影响,但可抑制巨噬细胞向M1型的极化.