人参皂苷Rg3对邻苯二甲酸二丁酯致小鼠生殖功能损伤的改善作用及其机制

目的:探讨人参皂苷Rg3对邻苯二甲酸二丁酯(DBP)诱导的雄性生殖功能损伤小鼠的生精保护作用,并阐明其作用机制.方法:30只6周龄清洁级C57BL/6小鼠随机分为对照组、DBP组(给予400 mg·kg-1 DBP)和DBP+Rg3组(给予400 mg·kg-1 DBP和20 mg·kg-1 Rg3),每组10只.实验期末处死小鼠并分析各组小鼠精子质量,HE染色观察各组小鼠睾丸组织形态表现,免疫组织化学法观察各组小鼠睾丸组织中间隙连接蛋白43(Cx43)的表达,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组小鼠睾丸组织中Src、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)和蛋白激酶B(Akt)mRNA表达水平,Western blotting法检测各组小鼠睾丸组织中磷酸化Src(p-Src)、磷酸化PI3K(p-PI3K)和磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达水平.结果:与对照组比较,DBP组小鼠的精子密度和精子活力均明显降低(P<0.01);与DBP组比较,DBP+Rg3组小鼠精子密度和精子活力均明显升高(P<0.01).HE染色,与DBP组比较,人参皂苷Rg3组小鼠睾丸组织病理学损伤有所改善.免疫组织化学法检测,与对照组比较,DBP组小鼠睾丸组织中Cx43蛋白表达量降低;与DBP组比较,DBP+Rg3组小鼠睾丸组织中Cx43蛋白表达量升高.RT-qPCR法检测,与对照组比较,DBP组小鼠睾丸组织中Src、PI3K和Akt mRNA的表达水平降低(P<0.01);与DBP组比较,DBP+Rg3组小鼠睾丸组织中Src、PI3K和Akt mRNA表达水平升高(P<0.01).Western blotting法检测,与对照组比较,DBP组小鼠睾丸组织中p-Src、p-PI3K和p-Akt蛋白表达水平降低(P<0.01),与DBP组比较,DBP+Rg3组小鼠睾丸组织中p-Src、p-PI3K和p-Akt蛋白表达水平升高(P<0.01).结论:人参皂苷Rg3对DBP诱导的小鼠生殖功能损伤具有改善作用,其机制可能是Rg3通过激活Src/PI3K/Akt通路,使Cx43表达上调,降低DBP暴露所致的血睾屏障的通透性,发挥生精损伤的保护作用.