氧化苦参碱对糖尿病大鼠骨代谢及CREB/CRTC1信号通路的影响
Journal of Zhengzhou University(Medical Sciences)(2021)
摘要
目的:探讨氧化苦参碱(OMT)对糖尿病大鼠骨代谢相关指标与CREB/CRTC1信号通路的影响.方法:40只SD大鼠分为正常对照组、糖尿病模型组、OMT低剂量组、OMT高剂量组,每组10只.糖尿病模型组和OMT低、高剂量组大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)构建糖尿病模型,OMT低、高剂量组大鼠在建模结束后分别给予100、200 mg/kg OMT灌胃,每日1次且持续7 d.给药结束24 h后邻甲酚酞络合铜比色法检测尿钙和血清钙、磷含量,ELISA法测定血清Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)、骨钙素(OC)及骨特异性碱性磷酸酶(BSAP)的含量.4周后取大鼠股骨,双能X射线检测骨密度,qRT-PCR检测股骨组织中ALP、CEBP、OPG、RANKL mRNA的表达水平,HE染色观察骨组织病理形态学改变,免疫组化染色检测股骨组织中OCN蛋白的表达,Western blot检测股骨组织中p-CREB、t-CREB、CRTC1蛋白的表达.结果:与正常对照组比较,糖尿病模型组和OMT低、高剂量组大鼠24 h尿量与尿钙含量升高,血清中CTX-Ⅰ、OC、BSAP的含量增加,骨密度降低,ALP、OPG mRNA表达下调,CEBP、RANKL mRNA表达上调;股骨组织中骨小梁减少、排列稀疏、断裂,OCN蛋白表达降低,p-CREB和CRTC1的蛋白表达上调,差异均有统计学意义(P<0.05).与糖尿病模型组比较,OMT低、高剂量组血清中CTX-Ⅰ、OC、BSAP的含量降低,骨密度增加,ALP mRNA表达上调,CEBP、RANKL mRNA表达下调;股骨组织中骨小梁有所增加、排列与连续性较好,OCN蛋白表达升高;OMT高剂量组p-CREB和CRTC1的蛋白表达下调,差异均有统计学意义(P<0.05).与OMT低剂量组比较,OMT高剂量组OPG mRNA表达上调,差异有统计学意义(P<0.05).结论:氧化苦参碱可以促进糖尿病大鼠骨形成,并有效抑制骨吸收,其作用可能与抑制CREB/CRTC1信号活化有关.
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