萝卜硫素预处理通过TLR4/MyD88/NF-κB通路对缺氧/复氧大鼠心肌细胞的保护作用

目的:探讨萝卜硫素对缺氧/复氧(H/R)大鼠心肌细胞的保护作用及可能机制.方法:大鼠原代心肌细胞分为5组,正常对照组不处理,H/R组建立H/R模型(缺氧3 h/复氧3 h),低、中、高浓度萝卜硫素组在分别给予0.1、1.0、5.0μmol/L萝卜硫素预处理1 h后建立H/R模型.采用倒置显微镜观察细胞形态,应用MTS法检测细胞存活率,ELISA法检测细胞培养液上清中LDH活性,探索萝卜硫素最佳作用浓度.另取大鼠原代心肌细胞分为3组,正常对照组、模型组和萝卜硫素组,萝卜硫素组以5.0μmol/L萝卜硫素预处理1 h后建立H/R模型.采用ELISA法检测细胞培养液上清中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β水平,Western blot法检测TLR4、MyD88、p-NF-κB p65蛋白的表达水平.结果:中、高浓度的萝卜硫素均能改善心肌细胞形态、细胞存活率及LDH活性,高浓度效果更好(P<0.05).萝卜硫素预处理能降低H/R心肌细胞培养液上清中TNF-α、IL-6、IL-1β的水平,减弱H/R心肌细胞中TLR4、MyD88、p-NF-κB p65蛋白的表达(P<0.05).结论:萝卜硫素能有效改善大鼠原代心肌细胞H/R损伤,其机制可能是通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路从而减轻炎症反应而实现.