高浓度雌二醇对刀豆蛋白A诱导小鼠急性自身免疫性肝炎的影响
wf(2021)
摘要
[目的]研究高浓度雌激素(EE)对急性自身免疫性肝炎(AIH)的影响,并初步探索其可能的作用机制.[方法]通过小鼠尾静脉注射刀豆蛋白A,建立急性自身免疫性肝炎模型.将20只8周龄雌性C57BL/6小鼠按体质量随机区组分组,分为4组:对照(Control)组,刀豆蛋白A(ConA)组,雌二醇(EE)组和雌二醇+刀豆蛋白组(EE+Co?nA),每组5只.雌鼠卵巢去势,分别持续腹腔注射雌二醇2周,最后一次给药24 h后,尾静脉注射刀豆蛋白A.模型的评估采用苏木素-伊红染色法和血清ATL和AST测定法.TUNEL法检测肝细胞凋亡情况,酶联免疫吸附实验检测血清TNF-α和IL-6的含量.利用小鼠肝细胞系AML2,各处理组加入不同浓度的雌二醇,处理24 h和48 h,CCK8法检测各组细胞增殖情况,Annexin V-PI法检测各组细胞凋亡率.[结果]苏木素-伊红染色结果显示:分别与Control组和ConA组相比,EE+ConA组肝脏损伤程度加重,且血清ALT和AST水平明显增高,(P<0.0001;P<0.0001),差异具有统计学意义.TUNEL染色结果显示:分别与Control组和ConA组相比,EE+ConA组TUNEL阳性细胞数量明显增高,(P<0.0001),差异具有统计学意义.酶联免疫吸附实验结果表明:分别与Control组和ConA组相比,EE+ConA组IL-6,TNF-α浓度明显增高,(P<0.0001,P=0.0247),差异具有统计学意义.CCK8检测细胞活性发现:高浓度雌二醇可以抑制AML12增殖活性,P<0.05,差异具有统计学意义.流式细胞结果显示:与Control组相比,高浓度雌二醇可以促进肝细胞凋亡,P<0.05,差异具有统计学意义.[结论]高浓度的雌二醇可能通过促进炎症因子TNF-α和IL-6的分泌,诱导肝细胞细胞凋亡,加重AIH小鼠肝脏炎症反应.
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