黄连素通过B细胞淋巴瘤-2/自噬相关基因复合体抑制自噬减轻脑缺血再灌注损伤的研究

目的 探讨黄连素保护脑缺血再灌注损伤的可能作用机制.方法 用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞模型,并随机分为模型组、对照组、实验组和联合组,每组12只;另取12只正常大鼠仅分离颈总、颈外、颈内动脉,作为假手术组.对照组给予腹腔注射100 mg·kg-1黄连素(10 mg·mL-1);实验组给予腹腔注射25 mg·kg-1 ABT-199(0.1 mol·L-1);联合组给予腹腔注射100 mg·kg-1黄连素(10 mg·mL-1)+25 mg·kg-1 ABT-199(0.1 mol·L-1);假手术组和模型组均给予腹腔注射等量0.9％NaCl.5组大鼠每天给药1次,连续给药2周.用Western Blot法检测脑组织中微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3-Ⅱ)和自噬相关基因(Beclin-1)蛋白的表达水平,用免疫共沉淀检测Beclin-1和Bcl-2蛋白结合情况.结果 实验组、联合组、对照组、模型组和假手术组的LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值分别为1.95±0.25,1.16±0.19,0.51±0.16,1.84±0.21和0.31±0.09,Beclin-1蛋白表达量分别为0.92±0.19,0.63±0.14,0.56±0.13,0.79±0.17和0.43±0.11,Beclin-1和Bcl-2结合程度分别为0.23±0.02,0.40±0.02,0.50±0.03,0.37±0.03和0.64±0.04,模型组的上述指标均较假手术组、对照组和联合组显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05),实验组的上述指标均较模型组和联合组显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 黄连素可减轻脑缺血再灌注损伤大鼠的脑损伤,其保护作用可能与促进Bcl-2与Beclin-1结合抑制自噬有关.