熊果酸对脂多糖诱导的人髓系白血病单核细胞来源巨噬细胞炎性因子的调节作用
The Chinese Journal of Clinical Pharmacology(2021)
Abstract
目的 探讨熊果酸(UA)对脂多糖(LPS)诱导的人髓系白血病单核细胞(THP-1)来源巨噬细胞(Mφ)白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达调节和可能机制.方法 对照组用佛波酯(PMA)处理THP-1细胞使其分化成巨噬细胞,模型组用脂多糖刺激THP-1源巨噬细胞建立炎症细胞模型,低、中、高浓度实验组在模型组的基础上分别加入5,10和20μmol·mL-1熊果酸处理12 h,然后加入脂多糖处理6 h.以噻唑蓝比色法检测细胞活性,以流式细胞术检测细胞凋亡和活性氧(ROS)产生,以实时定量聚合酶链反应检测IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA水平,以蛋白质印迹法检测含NLR家族Pyrin域蛋白3(NLRP3),胱天蛋白酶-1(caspase-1),IL-1β蛋白的表达.结果 对照组和低、中、高浓度实验组的细胞凋亡率分别为(2.20±0.52)%,(2.40±0.26)%,(5.23±0.52)%和(11.27±1.03)%.对照组、模型组和低、中、高浓度实验组的IL-1β基因相对表达量分别为1.02±0.14,16.46±2.99,14.22±0.50,7.41±0.79和2.20±0.57;IL-6基因相对表达量分别为1.08±0.28,17.61±5.55,4.42±0.41,2.14±0.23和1.56±0.37;TNF-α基因相对表达量分别为1.01±0.10,7.62±0.33,6.40±0.84,3.79±0.88和4.03±0.35;细胞ROS产生情况分别为(100.00±1.16)%,(131.70±4.41)%,(124.70±2.60)%,(107.30±1.45)%和(107.30±3.71)%;NLRP3蛋白表达的相对水平分别为1.18±0.01,1.31±0.02,1.20±0.02,0.94±0.01和0.97±0.01;caspase-1蛋白表达的相对水平分别为1.20±0.01,1.31±0.03,1.17±0.02,0.97±0.01和0.81±0.01;IL-1β蛋白表达的相对水平分别为0.89±0.01,1.10±0.01,1.22±0.02,0.95±0.02和0.89±0.01;上述指标,模型组与对照组比较,中、高浓度实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 熊果酸可能通过抑制ROS产生和NLRP3炎症小体的激活下调THP-1源巨噬细胞中炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达以发挥免疫调节的作用.
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