LC-MS/MS法测定血清样品中甘胆酸的浓度

目的 建立一种测定人血清中甘胆酸的液质联用方法.方法 以d-5甘胆酸作为内标,血清样品离心处理,经ZORBAX SB C18(2.1 mm×100 mm,3.5μm)色谱柱进行分离,流动相为乙腈-0.1％的甲酸水溶液(95:5),流速为0.25 mL·min-1,用电喷雾电离源(ESI),负离子方式,扫描方式为多反应监测(MRM).考察该方法的专属性、标准曲线与定量下限、准确度和精密度、提取回收率和基质效应、稳定性和稀释效应.结果 血清中内源性物质对测定无干扰,甘胆酸在0.01～10.00μg·mL-1线性关系良好(r=0.9981),提取回收率为76.39％～82.55％,日内、日间RSD在0.98％～14.70％,均<15％.内标归一化甘胆酸基质效应因子为基质效应在93.77％～103.43％.结论 该LC-MS/MS方法特异性强,灵敏度高,符合生物样本分析相关要求,适用于人血清中甘胆酸浓度的测定.