黄芪甲苷Ⅳ对高糖诱导的小鼠足细胞损伤的保护作用

目的 基于糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)介导的足细胞损伤探讨黄芪甲苷Ⅳ治疗糖尿病肾病的作用机制.方法 将小鼠足细胞分为5组:空白对照组、高糖组、黄芪甲苷Ⅳ组、过表达组和抑制药组.除空白对照组外,其余各组均用30 mmoL·L-1葡萄糖处理,同时黄芪甲苷Ⅳ组加入30μmol·L-1黄芪甲苷Ⅳ,过表达组转染GSK-3β重组质粒,抑制药组加入10μmol·L-1 GSK-3β抑制药SB216367,每组3个复孔.培养24 h后,蛋白质印迹法检测GSK-3β、磷酸化GSK-3β(pGSK-3β)、核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶(HO-1)水平(灰度值),酶联免疫吸附法检测超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧簇(NOS)的含量.结果 空白对照组、高糖组和黄芪甲苷Ⅳ组的GSK-3β的蛋白表达量分别为0.91±0.01,1.15±0.01和1.03±0.05;这3组的pGSK-3β蛋白表达量分别为0.99±0.07,0.51±0.05和0.90±0.03.空白对照组、高糖组、黄芪甲苷Ⅳ组和过表达组的SOD含量分别为(135.61±32.12),(90.33±18.02),(122.68±22.17)和(95.49±30.53)U·mg-1;这4组的NOS含量分别为(0.54±0.09),(1.34±0.12),(0.87±0.16)和(1.42±0.25)U·mg-1.空白对照组、高糖组、黄芪甲苷Ⅳ组、过表达组和抑制药组的Nrf2蛋白表达量分别为0.81±0.03,0.66±0.04,0.76±0.03,0.63±0.06和0.75±0.02;这5组的HO-1蛋白表达量分别为0.92±0.04,0.56±0.04,0.65±0.03,0.57±0.01和0.83±0.04.高糖组、过表达组的上述指标与空白对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);黄芪甲苷Ⅳ组、抑制药组的上述指标与高糖组相比,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).结论 黄芪甲苷Ⅳ对高糖诱导的小鼠足细胞损伤具有一定的保护作用,其机制可能与抑制GSK-3β,从而上调Nrf2和HO-1的表达,进一步抑制氧化应激有关.