同源基因A10对10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因信号通路的调控机制研究

目的 验证同源基因A10(hoxA10)对10号染色体缺失的磷酸酶、张力蛋白同源基因(pten)、磷脂酰肌醇-3-激酶(pi3k)和蛋白激酶B(Akt)信号通路的影响.方法 设计SD大鼠骨髓间充质干细胞hoxA10基因的短发夹RNA(shRNA)靶序列,并构建pLVSHG01-Rat HoxA10重组慢病毒.用敲低型慢病毒感染SD大鼠的骨髓间充质干细胞(BMSCs),将BMSCs分为感染组(感染hoxA10敲低型慢病毒)和空白对照组(未感染).用嘌呤霉素筛选出感染成功的细胞株后,以蛋白质印迹法检测感染后BMSCs中HoxA10蛋白表达,用实时荧光定量反转录-PCR法检测各组骨髓间充质干细胞中hoxA10、pten、pi3k和akt基因的表达水平.用双染流式细胞凋亡试剂盒检测各组细胞的凋亡率和周期.结果 成功构建了hoxA10低表达的SD大鼠骨髓间充质干细胞,空白对照组和感染组的hoxA10基因表达量分别为6.22±0.20和3.09±0.06;这2组的pten基因表达量分别为1.97±0.18和5.09±0.07;这2组的pi3k基因表达量分别为6.06±0.05和2.72±0.10;这2组的akt基因表达量分别为5.98±0.09和2.48±0.35.上述指标:空白对照组与感染组比较,差异均有统计学意义(均P<0.001).空白对照组的细胞凋亡率(18.88±1.71)％明显低于感染组(36.01±0.45)％,组间差异有统计学意义(P<0.05).结论 HoxA10基因能够负向调控pten/pi3 k/akt信号通路.