黄体生成素干预大鼠卵巢颗粒细胞的蛋白质组学分析

目的 分析黄体生成素(luteinizing hormone,LH)干预卵巢颗粒细胞后差异蛋白的表达,探讨LH对颗粒细胞作用中重要蛋白及其生物学功能.方法 体外分离培养大鼠原代卵巢颗粒细胞,给予LH处理3 h为实验组,生理盐水处理作为对照组.通过液相色谱-质谱(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)联用法得到蛋白样品二级质谱,利用质谱数据库筛选显著差异表达蛋白,对差异表达蛋白进行生物信息学分析,并通过Western blot对部分差异蛋白进行验证.结果 与对照组相比,LH干预组共有57个蛋白表达有显著差异,其中25个上调,32个下调;生物信息学分析显示多数差异蛋白具有结合活性和催化活性,主要富集于酶代谢过程中及参与调控细胞代谢过程;Western blot验证发现调控细胞增殖与极性的蛋白Pard3、Mark3表达上调,抗氧化应激蛋白Gstp1和Nqo1的表达量下调,与蛋白质组学结果一致.结论 LH可引起卵巢颗粒细胞多种差异蛋白表达,影响颗粒细胞间的结合方式、激素合成能力、氧化应激及细胞周期和增殖等功能,且差异蛋白涉及多条相关细胞信号通路传导,提示LH从多方面影响卵巢颗粒细胞的功能.