番茄细菌性叶斑病菌单克隆抗体的制备与鉴定

用纯培养的番茄细菌性叶斑病菌(Pseudomonas syringae pv.tomato,Pst)免疫B ALB/c小鼠,取免疫好的小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,采用有限稀释和间接ELISA法,筛选得到了1株稳定分泌Pst单克隆抗体的杂交瘤细胞株Pst 10号,经鉴定其分泌的免疫球蛋白亚类为IgG1型,轻链为K型.间接ELISA显示该单克隆抗体的效价为1∶1.02×105,亲和常数为9.65×108.用碱性磷酸酯酶标记单克隆抗体所建立的双抗体夹心酶联免疫吸附(DAS-ELISA)测定可有效地检测出Pst的3个菌株,而与其他8种细菌不产生反应.检测灵敏度为105CFU/mL.