进境番茄种子中番茄褐色皱纹果病毒的检测鉴定

番茄褐色皱纹果病毒(tomato brown rugose fruit virus,ToBRFV)是烟草花叶病毒属新成员,番茄和辣椒是其主要寄主,被中国、欧盟、美国、澳大利亚、土耳其、新西兰、智利、阿根廷、俄罗斯、哈萨克斯坦、泰国等国家或地区纳入需检疫的有害生物.我们利用电镜观察、RT-PCR和SYBR Green实时荧光RT-PCR首次从进境的番茄种子检出ToBRFV.电镜观察显示该样品所携带的病毒粒子形态符合烟草花叶病毒属病毒的粒子特征,RT-PCR扩增出特异的条带,实时荧光RT-PCR有明显的扩增曲线,PCR产物测序结果与ToBRFV(GenBank登录号MK133093.1和KT383474.1)同源性高达99.65％.