miR-30a对脂多糖诱导人脐静脉血管内皮细胞自噬的影响
Zhejiang Medical Journal(2021)
Abstract
目的 探究miR-30a对脂多糖(LPS)诱导人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)自噬的影响及其可能机制.方法 以HUVEC为研究对象,分为空白对照组(Control组)、模型组(LPS组)、阴性对照组(转染miR-30a-NC,NC组)和过表达组(转染miR-30a-mimics,mimics组),采用LPS诱导HUVEC建立炎症模型;采用CCK-8法检测细胞存活率;qRT-PCR法检测miR-30a相对表达量;Western blot法检测自噬相关蛋白自噬相关基因(Atg3)、p62、自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)-II和LC3-I表达水平;激光共聚焦显微镜法观察自噬小体形成变化.结果 LPS组细胞存活率明显低于Control组,miR-30a相对表达量明显低于Control组,差异均有统计学意义(均P<0.05).与Control组比较,LPS组细胞p62蛋白表达水平降低,Atg3蛋白表达水平升高,LC3-II/LC3-I比值升高,差异均有统计学意义(均P<0.05).转染miR-30a后,与LPS组比较,mimics组细胞存活率明显升高,miR-30a相对表达量明显上升,差异均有统计学意义(均P<0.05).与LPS组比较,mimics组细胞p62表达水平升高,LC3-II/LC3-I比值和Atg3表达水平降低,差异均有统计学意义(均P<0.05).与LPS组比较,mimics组细胞胞质内自噬小体显著减少.结论 miR-30a能通过抑制自噬减轻LPS诱导HUVEC损伤.
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