LAMP法检测食品中开心果过敏原成分

Hao LIU,Wen-sheng HUANG,Ting-ting DENG,Kai FU,Xing-rong JU,Ying CHEN

Food Science（2013）

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摘要

为建立食品中开心果过敏原成分的环介导等温扩增(LAMP)检测方法,根据GenBank中公布的开心果过敏原2S种子贮存蛋白基因序列设计合成LAMP引物,筛选最佳引物并对其内引物浓度进行优化.以开心果、腰果、胡桃等坚果类以及大米、玉米、大豆等常见农产品验证该方法的特异性,将开心果DNA进行梯度稀释以验证方法的检测低限,并以小麦为基质配制模拟添加样品测试方法的相对灵敏度.结果表明:该方法能够特异性检测食品中的开心果成分,对开心果基因组DNA的检测限为0.2ng,食品中开心果成分相对检测灵敏度低于0.1％(m/m),通过在反应终产物中加入SYBR Green Ⅰ,可用肉眼判断检测结果,LAMP检测时间不超过60min.该方法快速准确,不依赖复杂昂贵的检测仪器,可应用于过敏原开心果成分的快速检测.

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关键词

pistachio allergen,isothermal amplification method,foods,loop-mediated

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