地西他滨逆转人乳腺癌细胞中miR-5047基因甲基化状态的研究

目的 探讨地西他滨对人乳腺癌细胞中miR-5047 表达及其启动子甲基化状态的影响.方法 用甲基化特异性PCR(MSP)法和qRT-PCR 法分别检测人乳腺正常MCF-10A 细胞和人乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7 细胞中miR-5047 的表达水平及miR-5047 启动子区的甲基化状态.用5 μmol/L 和10 μmol/L浓度的地西他滨分别处理MDA-MB-231 细胞,MSP 法检测miR-5047 启动子区的甲基化状态,qRT-PCR 法检测miR-5047 的表达.结果 与人乳腺正常上皮细胞MCF-10A 相比,乳腺癌MDA-MB-231 和MCF-7 细胞中miR-5047 呈低表达,而其启动子区均呈高甲基化状态;地西他滨处理后,MDA-MB-231 细胞中miR-5047 启动子区的甲基化水平明显降低,miR-5047 表达水平则显著升高.结论 地西他滨可通过降低乳腺癌细胞中miR-5047基因启动子区甲基化水平从而促进miR-5047 的表达.