暴马桑黄gpd启动子的克隆与序列分析

暴马桑黄药用价值很高,但是其含有的一些药用成分含量很低,运用基因工程技术对暴马桑黄进行改造,是培育优质暴马桑黄的有效手段.本试验对暴马桑黄三磷酸甘油醛脱氢酶(gpd)启动子进行基因克隆,从暴马桑黄中克隆得到一段1380 bp的gpd启动子序列.核心启动子区是转录因子和RNA聚合酶的结合区域,对启动子活性有较大影响,序列分析发现gpd启动子在995-1045 bp之间是核心启动子区的概率最高(0.99);作用元件预测结果显示,gpd启动子含有CAAT-box、TATA-box等典型的启动子顺式作用元件,以及参与低温响应的顺式作用元件LTR、参与脱落酸反应的顺式作用元件ABRE等多种重要的作用元件;启动子序列中处于非甲基化状态的CpG岛是基因转录所必需的,经过预测发现gpd序列在7-1380 bp之间存在一个CpG岛;此外在该启动子序列中还发现AP1、MAF等多种转录因子的结合位点,这些位点是启动子上与转录因子相结合的DNA片段,是一些转录开始的关键结合部位.结论:通过以上结果初步判断克隆得到的gpd启动子具有调控外源基因表达的能力.