紫萼玉簪查尔酮合酶基因的克隆及功能验证

查尔酮合酶是花色素生物合成过程中的关键酶.为研究玉簪查尔酮合酶基因的结构及功能,基于玉簪转录组数据库信息,利用RT-PCR的方法克隆得到紫萼玉簪查尔酮合酶基因,命名为HvCHS,构建pCAM-BIA3301-HvCHS载体,农杆菌介导法转化烟草,验证HvCHS基因功能.结果表明:HvCHS基因的ORF全长1 176 bp,编码391个氨基酸,分子质量为42.798 kD,等电点为6.48,是亲水性的同源二聚体蛋白;预测亚细胞定位于细胞质中,与大花君子兰Clivia miniata(ARI70436.1)、水仙Narcissus tazetta var.chinensis(AFM36770.1)的同源性较高;转基因烟草的花瓣中花色苷含量明显高于野生型烟草,说明HvCHS基因的过表达能够促进花色苷积累.