健康与腹泻仔猪源A型产气荚膜梭菌的多位点序列分型

A型产气荚膜梭菌(CpA)存在于健康仔猪肠道,同时也是仔猪肠毒血症的关键病原.为研究两者的差异,本试验在江西省4个地区采集健康和腹泻仔猪粪便样本分离得到CpA,通过16S rRNA鉴定所有CpA分离株,并通过多重PCR确定分离株的毒素分型.采用MLST多位点序列分型技术对选取的24株CpA(腹泻或健康来源CpA各12株)进行聚类分析,根据菌株的ST型用UPGMA和NJ两种方法构建系统进化树.结果显示,8个管家基因中glpk基因相对保守,recA和plc基因变异程度较大,等位基因中存在可变位点的比例为1.8％(tpi)至6.1％(plc),腹泻源与健康源CpA遗传差异不明显;无论是否增添plc基因,对整体聚类分析结果无明显影响,但腹泻源CpA(75％)的plc等位基因比例明显高于健康源(33.3％).根据24株CpA的ST型的聚类分析发现,75％的健康源CpA聚集在同一亚组CC1中,而CC2中聚类了2个地区的腹泻源CpA,有较高的遗传多态性.在12株腹泻源CpA的ST型聚类分析中,同一地区的CpA之间存在更近的亲缘关系,这表明其基因突变有一定的规律和方向性.因此推测,CpA的产毒致病性可能与地域环境密切相关.