PPARγ激动因子与胰岛素互作影响延边黄牛前脂肪细胞分化

本试验旨在研究胰岛素和PPARγ激动因子对延边黄牛前脂肪细胞脂质代谢的影响.利用胶原酶消化法在无菌条件下分离获得延边黄牛原代脂肪细胞并进行体外培养,试验分为对照组(10 mg/L胰岛素)、IC组(10 mg/L胰岛素+10 mg/L环格列酮),IO组(10 mg/L胰岛素+100 μmol/L油酸)和ICO组(10 mg/L胰岛素+10 mg/L环格列酮+100 μmol/L油酸),通过油红O染色法、甘油三酯含量测定及实时荧光定量RT-PCR等方法检测诱导分化处理96h后,脂滴生成情况以及对脂肪细胞分化相关的主要标志基因PPARγ、SCD、LPL、SREBP1和C/EBPβ mRNA表达的影响.油红O染色和甘油三酯测定结果显示,各试验组均可促进脂滴的形成和甘油三酯的积累,且相比于对照组和IC组,添加胰岛素和油酸的处理可更有效地促进延边黄牛前脂肪细胞脂滴的形成和甘油三酯含量的积累.实时荧光定量PCR结果显示,胰岛素与环格列酮和油酸共处理可提高PPARγ、SCD、LPL和C/EBPα的表达量,胰岛素与油酸共处理在提高PPARγ、C/EBPα和SREBP1基因mRNA表达量的同时,降低了SCD和LPL基因mRNA的表达,胰岛素与环格列酮共处理均显著提高了各基因mRNA的表达量(P＜0.05).试验结果为研究胰岛素、环格列酮和油酸三者互作效果在调节脂肪生成中的功能和分子机制提供了依据.