河北省部分地区犊牛腹泻大肠杆菌优势血清型筛选及兼性菌毛株的致病性

从河北省4个地区的奶牛场采集1月龄左右腹泻犊牛的新鲜粪便,通过病原的分离培养、革兰染色、生化鉴定、16S rRNA基因PCR及测序来分离和鉴定大肠杆菌;采用11种大肠杆菌O因子定型血清对分离菌进行大肠杆菌优势血清型鉴定;利用菌毛特异性引物对优势血清型菌株进行菌毛基因PCR扩增及序列测定和分析,鉴定其所携带菌毛抗原.通过小鼠攻毒试验评价分离得到的大肠杆菌F41菌毛株、K99菌毛株及兼性F41-K99菌毛株的致病性.结果显示,采集的56份犊牛腹泻粪便样品分离鉴定出48株大肠杆菌.大肠杆菌O因子定型血清鉴定结果显示,4个地区流行的犊牛腹泻大肠杆菌优势血清型均为O101型.菌毛PCR测序结果鉴定出6株携带K99菌毛大肠杆菌,7株携带F41菌毛大肠杆菌,其中1株为兼性F41-K99菌毛大肠杆菌.小鼠致病性试验结果显示,3株分离菌对小鼠均有致病性,其中兼性F41-K99菌毛株临床症状最明显,最小致死剂量最低,为1.5×1010 CFU/mL,且死亡小鼠的脏器病理变化最严重,所以兼性菌毛株对小鼠的致病性最强.