布鲁菌Ⅳ型分泌系统非依赖型效应蛋白BspⅠ诱导巨噬细胞内质网应激

布鲁菌感染能引起巨噬细胞内质网应激反应,其Ⅳ型分泌系统依赖性效应蛋白在应激反应中起着重要调控作用,但是有关Ⅳ型分泌系统非依赖性效应蛋白调节应激反应的研究尚未见报道.本试验以Ⅳ型分泌系统非依赖性效应蛋白BspⅠ为研究对象,通过GST-Bip融合蛋白互作试验与质谱分析发现;BspⅠ蛋白能与巨噬细胞RAW264.7内质网应激反应中的未折叠蛋白反应分子伴侣Bip结合.通过构建pET28a-BspⅠ表达载体,表达且纯化BspⅠ蛋白,用其刺激巨噬细胞RAW264.7,荧光定量PCR及Western blot结果表明BspI能激活未折叠蛋白反应3条通路中的IRE1通路;同时ELISA试验表明BspⅠ刺激能导致细胞中与应激反应相关的炎症因子IL-6和TNF-α升高.上述结果证明布鲁菌可通过其分泌的Ⅳ型分泌系统非依赖性效应蛋白引起巨噬细胞内质网应激反应,这将为进一步深入研究布鲁菌感染引起的内质网应激提供新思路.