蜱源淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒半巢式PCR检测方法的建立
Chinese Veterinary Science（2021）
摘要
为建立快速、敏感的蜱源淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)检测方法,根据GenBank中已登录的蜱源LCMV NP基因序列设计半巢式PCR引物,通过优化反应条件建立半巢式PCR检测方法.结果 显示,用该方法能扩增出248 bp的目的片段,与LCMV序列(MG554174)的同源性为100％.特异性试验结果显示,该方法对蜱传脑炎病毒、发热板血小板减少综合征病毒、阿龙山病毒的基因扩增无条带.敏感性试验结果显示,该方法最低可以检出0.45×102 copies/μL的蜱源LCMV NP蛋白基因,是普通PCR的1 000倍.对总数为150只森林革蜱、草原革蜱和全沟硬蜱样品的检测发现,半巢式PCR、普通PCR的检出率分别是18％和0.蜱源LCMV半巢式PCR方法的建立为蜱源淋巴细胞脉络丛脑膜炎的防控提供了技术支持.
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