葛根素通过激活p38 MAPK信号通路促进MC3T3-E1细胞增殖的研究

为研究葛根素(PUE)对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-El)的作用及其所关联的信号通路.通过培养MC3T3-El细胞,运用CCK-8法对比加入不同浓度葛根素后细胞的增殖能力;通过CCK-8法检测最适浓度葛根素在不同时间对细胞增殖的影响;通过pNPP法测定碱性磷酸酶(ALP)的活性以检测不同浓度葛根素对细胞分化的影响;通过向p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen activated proteinkinase,p38 MAPK)信号通路中加入p38抑制剂SB203580分析细胞分化水平;通过蛋白质免疫印迹技术检测p38磷酸化蛋白(P-p38)表达水平;通过ELISA检测Ⅰ型胶原分泌水平.结果显示,不同浓度葛根素作用于MC3T3-El细胞,可以不同程度促进细胞的增殖和分化,其中浓度为1×10-6 mol/L葛根素组的促进作用显著高于其他组.最适浓度葛根素在不同时间对细胞增殖作用有明显差异,其中48h对细胞增殖作用最为显著.葛根素可以激活ALP,促进Ⅰ型胶原分泌,诱导细胞的分化.使用抑制剂SB203580阻断p38 MAPK信号通路后,相比于对照组,细胞增殖、ALP活力以及P-p38蛋白的表达水平明显降低.结果表明,葛根素可以通过激活p38 MAPK信号通路促进MC3T3-E1细胞增殖和分化.