布莱凯特黑牛CB1基因克隆测序及表达分析

本试验旨在研究布莱凯特黑牛CB1基因CDS区序列和表达情况,探讨CB1基因与脂肪沉积的关系.运用RT-PCR技术克隆CB1基因CDS区序列,并进行生物学分析;运用qRT-PCR技术检测不同组织的mRNA相对表达量;以及运用免疫组化技术对蛋白进行定位分析,运用Western blot技术检测CB1蛋白在不同组织的表达量.结果显示,克隆获得的布莱凯特黑牛CB1基因CDS为1 495 bp,编码477个氨基酸.进化树显示布莱凯特黑牛CB1基因与牛、山羊、绵羊同源性最高(＞98％).qRT-PCR结果显示CB1基因在不同组织均有表达,在脂肪组织中相对表达量最高;免疫组化显示CB1基因主要在脂肪细胞膜上表达;Western blot结果显示CB1蛋白在脂肪组织和肌肉组织均有表达,在脂肪组织表达量显著高于肌肉组织.综上推测,CB1基因参与脂质代谢相关调节过程,为肉牛肉质性状的分子选育提供参考.