抗菌肽Temprine-La(FS)抑制耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌生物被膜形成的研究

为了探究抗菌肽Temprine-La(FS)对耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌(MRSP)生物被膜形成的影响,本试验以Temprine-La为基序进行氨基酸改造合成新的抗菌肽(T-La(S)、T-La(FS)、RGD-T-La(S)、RGD-T-La(FS)以提高抗菌活性.通过微量稀释法测定多肽对MRSP生物被膜的最小抑菌浓度(MBIC);结晶紫染色法(CV)检测多肽对MRSP生物被膜形成能力的影响;XTT法检测多肽对MRSP生物被膜代谢活性的影响、多肽对MRSP生物被膜胞外多糖含量的影响;扫描电镜(SEM)检测多肽对MRSP生物被膜形成的影响;荧光定量PCR法(q-PCR)分析多肽对MRSP生物被膜相关基因转录水平的影响.结果显示,T-La(S)、RGD-T-La(S)、T-La(FS)、RGD-T-La(FS)对 MRSP 的 MBIC 分别为:31.3、15.6、7.8、15.6 μg/mL;结晶紫染色法(CV)表明 T-La(S)、RGD-T-La(S)、T-La(FS)、RGD-T-La(FS)对MRSP生物被膜形成有抑制作用;扫描电镜(SEM)结果显示多肽使MRSP生物被膜中细胞外基质大量减少,菌体裸露在物体表面;多肽可以显著降低MRSP生物被膜的代谢活性,抑制被膜菌的粘附作用;多肽能有效抑制MRSP生物被膜合成胞外多糖;荧光定量PCR结果表明,多肽作用后能够降低MRSP生物被膜相关基因的转录水平.因此,多肽主要通过影响生物被膜相关基因转录水平和阻断胞外多糖的合成与分泌来抑制MRSP生物被膜的形成.