液质联用法同时测定干血斑中环孢菌素A、西罗莫司、他克莫司和依维莫司药物浓度

建立了液相色谱-串联质谱法同时定量检测干血斑中4种临床常用免疫抑制剂的方法.打孔裁取直径8 mm的干血斑样本,经甲醇-乙腈混合溶液提取和沉淀蛋白后取上清液氮气吹干,甲醇溶液复溶后进样分析.选用C18色谱柱分离,甲醇与水(均含2mM乙酸铵和0.1％甲酸)为流动相梯度洗脱,在电喷雾正离子电离(ESI+)和多反应监测(MRM)模式下检测.结果表明:环孢菌素A在20～1000ng/mL范围内,西罗莫司、他克莫司和依维莫司在2.0～100ng/mL范围内线性良好.该方法对病患友善(样本采血量仅30μL),提取回收率高(73.6％～110.8％),其准确度、精密度(CV)、残留效应和基质效应均符合生物样品的分析要求.该方法快速、高效、灵敏度高、精确度好,适用于干血斑中同时测定环孢菌素A、西罗莫司、他克莫司和依维莫司浓度.