新型欧洲鳗鲡抗菌肽elecilin在毕赤酵母中的表达
Journal of Animal Husbandry and Veterinary Medicine Fujian（2021）
摘要
前期采用差减杂交的方法筛选到新型欧洲鳗鲡抗菌肽elecilin,其基因全长为477 bp,编码159个氨基酸,理论分子量约17.4 kDa.为了获得具活性的大量表达的抗菌肽,本研究利用毕赤酵母表达了elecilin.首先将elecilin基因克隆至酵母分泌表达载体pPICZaA,构建了重组分泌表达质粒pPICZaA-elecilin,电击转化毕赤酵母X-33.经Zeocin筛选和PCR鉴定,获得重组酵母菌,通过甲醇诱导,SDS-PAGE和Western blot鉴定,证实诱导后的培养基中存在与预期分子量大小相一致的蛋白,能被His-tag单克隆抗体识别,表明利用酵母成功表达了欧洲鳗鲡抗菌肽elecilin.这为进一步研究该抗菌肽的功能及作为饲料添加剂的应用奠定了基础.
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