大动脉转位候选基因DYNC2LI1的发现与功能分析

目的 通过遗传学分析及功能学实验发现新的大动脉转位候选基因.方法 对381例散发大动脉转位患者进行全外显子组测序,利用基因负荷分析筛选候选基因.针对患者中发现的不同突变,进行突变功能分析:构建体外表达质粒,并采用实时荧光定量PCR及Western blot检测mRNA及蛋白质的表达情况.在NIH3T3成纤维细胞中敲低目的 基因,并对表达谱进行通路富集分析.结果 与人群突变相比,大动脉转位组中DYNC2LI1基因突变负荷显著增加,提示DYNC2LI1基因突变与大动脉转位的发生存在必然联系.相比于野生型质粒,D YNC2LI1基因突变c.A239C,p.D80A的mRNA及蛋白的表达水平均显著降低,差异有统计学意义(P＜0.0001,P＜0.01);c.T240A,p.D80E和c.T389C,p.L130R的mRNA的表达量同样明显降低(P＜0.001,P＜0.05),但蛋白表达没有明显差异(P＞0.05).对D YNC2LI1敲低后的细胞转录组分析发现,伪结构组装相关通路的基因显著上调;而与心脏结构发育及体轴形态等通路相关的基因发生下调.结论 与纤毛结构和功能相关的DYNC2LH基因是大动脉转位的潜在致病基因.