艾司洛尔对脓毒症急性肾损伤大鼠的保护作用

目的 基于细胞周期阻滞探讨艾司洛尔对脓毒症急性肾损伤(SAKI)大鼠保护作用的可能机制.方法 48只雄性SD大鼠,按随机数字表法分为假手术组(Sham组)、模型组(CLP组)、试验组(ES组),每组16只又随机平均分为6 h组和24 h组.Sham组采用盲肠探查法,CLP组与ES组采用盲肠结扎穿刺术法建立脓毒症模型.造模成功后Sham组与CLP组分别经颈内静脉置管泵入生理盐水(速度为1 mL/h),ES组泵入艾司洛尔[给药量为15 mg/(kg·h),速度为1 ml/h].泵药6 h后分别于术后6、24 h相应时间点处死各组大鼠,留取血清及组织标本.大鼠血液离心后采用ELISA法检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)含量;摘取两侧肾脏,其中左侧肾脏行p53免疫组化染色,观察细胞周期阻滞情况;右侧肾脏组织置于-80℃超低温保存箱保存,待组织匀浆后一部分行Western blot分析,检测Toll样受体4(TLR-4)、核因子κB(NF-κB)、毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白(ATM)的表达水平,另一部分肾脏组织行ELISA检测基质金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)、胰岛素样生长因子结合蛋白-7(IGFBP-7)水平.结果 (1)TLR-4与NF-κB水平:ES 6 h组和CLP 6 h组较Sham 6 h组升高(P<0.05),CLP 24 h组较Sham 24 h组升高(P<0.05),ES 24 h组TLR-4水平较CLP 24 h组下降(P<0.05).(2)大鼠血清Cr、BUN水平:ES 6 h组和CLP 6 h组较Sham 6 h组明显升高(P<0.05),ES 24 h组较CLP 24 h组降低(P<0.05).(3)在术后6 h和24 h中,与Sham组相比,CLP组与ES组大鼠肾脏组织IGFBP-7、TIMP-2、ATM、p53水平均明显升高(P<0.05),同时ES组上述因子水平较CLP组降低(P<0.05).结论 艾司洛尔可能通过影响TLR-4/NF-κB/ATM/p53通路关键蛋白,减轻炎症反应和肾小管上皮细胞周期阻滞,促进SAKI大鼠肾功能恢复,进而对SAKI大鼠起到保护作用.