6种克罗诺杆菌精准鉴定及标准物质的制备研究

目的 制备具有我国食源性特点的6种克罗诺杆菌检验用标准物质.方法 通过生化、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)及二代高通量全基因组测序技术对研究用菌株进行菌种鉴定确认后,制备104 CFU/样品浓度的标准物质.参照CNAS—GL003:2008《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》等标准要求对样品进行均匀性检验后,采用单因素方差分析对结果进行评价.将样品放于-20、4、25和37℃条件下,分别进行运输稳定性检验及储存稳定性检验.依据GB 4789.15—2016《食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数》,将研制的6种标准物质分别加入20件乳粉样品中进行检验,检测真实食品样品中适用性.结果 6株菌株生化鉴定结果均为阪崎克罗诺杆菌属(Cronobacter sakazakii),准确度为92％～99％;MALDI-TOF MS鉴定结果均为阪崎克罗诺杆菌(Cronobacter sakazakii),分数为1.914～2.244;全基因组测序鉴定结果与菌株已知种或亚种信息一致.6种标准物质F值分别为0.422、0.922、0.980、0.409、0.721及0.631,F