食品检验用解脂耶氏酵母菌标准物质制备研究

目的 制备解脂耶氏酵母菌检验用标准物质,以满足实验室酵母菌日常检验质量控制及实验室间比对需求.方法 通过生化、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)及转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)位点测序,对研究用菌株进行菌种鉴定确认后冻干,制备104 CFU/样品浓度的标准物质.参照CNAS—GL003:2008《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》等的要求进行均匀性检验后,采用单因素方差分析对结果进行评价.样品放于-20、4、25和37℃条件下,分别进行运输稳定性检验及储存稳定性检验.依据GB 4789.15—2016《食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数》,验证标准物质在真实食品样品中适用性.结果 CMCC98025经生化鉴定为解脂耶氏酵母菌,准确度为93％;MALDI-TOF MS鉴定结果为解脂耶氏酵母,分数为2.012;ITS位点测序与美国国家生物信息中心基因库中序列比对,匹配最优结果为解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica).均匀性测试结果符合正态分布,F0.05(19,20)=2.137,F=1.697