非洲猪瘟病毒核酸荧光定量PCR检测方法研究

目的 建立非洲猪瘟病毒核酸的荧光定量PCR检测方法,并与微滴式数字PCR检测方法的优缺点进行比较.方法 根据非洲猪瘟病毒保守基因VP72和K205设计合成引物和探针,探究荧光定量PCR检测方法的反应条件和方法的特异性、线性、灵敏性和重复性,及其与微滴式数字PCR检测方法灵敏度差异.结果 本研究建立的非洲猪瘟病毒核酸荧光定量PCR检测方法检出限达到0.1 fg/反应,在0.1～500.0 fg/反应范围内呈现良好的线性关系,检测重复性变异系数均低于1％,不与猪瘟病毒、猪蓝耳病毒发生交叉反应.结论 本研究建立的荧光定量PCR法灵敏度高、特异性强,适用于猪肉及其制品中非洲猪瘟病毒的检测.