茶皂素对志贺菌感染的保护作用及其机制研究

目的:探究茶皂素（TS）对志贺菌感染性肠炎的保护作用及其机制研究。方法:实验分体外实验和体内实验。体外实验：通过微量肉汤稀释法检测TS对志贺菌的抗菌活性；使用酶标仪检测不同浓度TS作用下菌液的600 nm下的吸光度（ A600），绘制生长曲线；通过平板菌落计数检测细菌数。体内实验：将15只小鼠分为对照组、福氏2a志贺菌301株（Sf301）组和TS组，每组5只。Sf301组和TS组连续8 d分别灌胃无菌水或TS，于第3天制备志贺菌感染小鼠模型。用疾病活动指数（DAI）评价小鼠的一般情况。于第8天处死小鼠，测量各组小鼠结肠长度，取结肠组织行HE染色，观察病理学变化；取小鼠盲肠内容物与粪便进行平板计数，检测志贺菌载量；用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测结肠炎症因子的mRNA表达水平。 结果:（1）体外实验：TS的最小抑菌浓度（MIC）为1 024 μg/ml，不同浓度的TS（256、512、1 024 μg/ml）的平板菌落计数、 A600依次减小，与对照组比较，差异均有统计学意义（均 P<0.05）。（2）体内实验：对照组、TS组小鼠结肠分别为（7.70±0.24）、（7.35±0.41） cm，与Sf301组［（6.13±0.05） cm］比较，差异有统计学意义（ P<0.05）。组织病理学结果显示Sf301组结肠上皮细胞脱落，杯状细胞减少，炎性细胞浸润。而TS组结肠黏膜较完整，无炎性细胞浸润。与Sf301组比较，TS组小鼠盲肠内容物细菌载量更低（ P<0.05）。TS组的肿瘤坏死因子-α水平低于Sf301组，白细胞介素-10水平高于Sf301组（均 P<0.05）。 结论:TS可有效抑制志贺菌，通过减少志贺菌载量和抑制炎症缓解志贺菌感染性肠炎。