ChIL-2-ChIL-4融合基因重组质粒遗传稳定性研究

为研究大规模生产过程中DH5α/pUC57重组菌携带的表达鸡白细胞介素-2(ChIL-2)和白细胞介素-4(ChIL-4)融合基因质粒的遗传稳定性,探讨其作为鸡球虫活疫苗免疫佐剂的商业化批量生产的潜力,本文通过对重组质粒连续30代传代培养的方式,进行实验室遗传稳定性鉴定.研究结果显示:重组菌在含有氨苄青霉素(Amp+)的溶菌肉汤(LB)平板上传代30次均保持革兰氏阴性(G-),发酵葡萄糖及甘露醇并产生特异现象,但不发酵乳糖;重组菌与大肠杆菌16S rDNA片段的同源性均大于95％,各代重组质粒超螺旋比均大于90％,质粒丢失率均为0;重组质粒的表达产物具有刺激无特定病原体(SPF)雏鸡脾脏淋巴细胞的分化能力.结果表明,ChIL-2-ChIL-4融合基因重组菌和重组质粒30代内结构稳定、分离稳定,能够为扩大生产提供物质支持.