Effect of abdominal paracentesis drainage on TLR 4 expression in intestine of rats with severe acute pancreatitis and its significance

[摘要] 目的 探讨早期腹腔穿刺引流(APD)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肠道Toll样受体4(TLR4)表达的影响及意 义。方法 雄性SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、SAP组和APD组,每组15只。采用5%牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射法 建立SAP大鼠模型,在此基础上于大鼠右下腹置入引流管建立APD模型。建模后24h采集血样、小肠和胰腺组织,HE 染色观察小肠组织和胰腺组织的病理学变化,采用全自动生化仪检测血清淀粉酶和脂肪酶活性,鲎试剂法检测血清内 毒素水平,紫外比色法检测血清二胺氧化酶(DAO)活性,ELISA法检测小肠组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介 素-6(IL-6)水平以及血清D-乳酸水平,TUNEL法检测肠黏膜上皮细胞凋亡情况,RT-PCR检测小肠组织TLR4 mRNA的表 达水平,免疫组化和Western blotting检测TLR4信号通路关键分子和凋亡相关蛋白的表达。结果 与SAP组比较,APD组 大鼠小肠和胰腺组织病理损伤明显减轻,病理评分明显降低(P<0.05),血清淀粉酶、脂肪酶和DAO活性以及TNF-α、 IL -6、D-乳酸和内毒素水平也明显降低(P<0.05)。与SAP组比较,APD组小肠组织TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、 核因子-κB(NF-κB)p65、TNF-α和IL -6的表达明显降低(P<0.05)。此外,APD组小肠黏膜上皮细胞凋亡指数、cleavedcaspase-3和Bax的表达较SAP组明显降低,Bcl-2的表达明显升高(P<0.05)。结论 早期实施APD能显著降低SAP大鼠肠道 TLR4的表达,抑制下游炎症信号通路的激活,进而减少肠黏膜上皮细胞凋亡的发生,发挥肠道保护作用。 [关键词] 重症急性胰腺炎;腹腔穿刺引流;肠道损伤;Toll样受体4 [中图分类号] R657.51 [文献标志码] A [文章编号] 0577-7402(2020)12-1215-07 [DOI] 10.11855/j.issn.0577-7402.2020.12.01