疏棉状嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus)脂肪酶的理性设计提高其活性和温度稳定性

目的:通过对疏棉状嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus)脂肪酶的理性设计,获得高酶活与耐高温的脂肪酶品种,为脂肪酶在饲料、油脂加工和生物柴油等领域的应用奠定基础.方法:对脂肪酶典型结构域lid和loop区域的系统发育分析,找到候选的位点,理性设计并通过实验验证,获得脂肪酶活性和耐高温特性显著提高的脂肪酶重组子,并构建多拷贝载体,完成50L发酵罐中进行产酶能力评价.结果:经过设计的脂肪酶高温稳定性显著提升.其在80℃下放置12h后仍保留78.94％的酶活.脂肪酶重组子在50L发酵罐中发酵诱导168h,其上清液酶活达到29 000U/mL.结论:成功设计并获得了一种新型的高活性、耐高温的脂肪酶品种TLL,并实现了高效表达,为其产业化和工业应用奠定了基础.