Des lymphocytes B mémoires avec un phénotype unique persistent dans la rate de patients traités par rituximab au cours de la thrombopénie immunologique de l’adulte

Introduction Au cours de la thrombopenie immunologique (PTI), la depletion lymphocytaire B observee dans le sang peripherique apres rituximab (RTX) est habituellement complete. Ceci contraste avec des donnees obtenues au laboratoire suggerant que des lymphocytes B memoires ayant resiste au RTX peuvent participer aux rechutes a distance du traitement. Patients et methodes Afin de rechercher la presence eventuelle de lymphocytes B residuels apres RTX, nous avons analyse les tissus spleniques de patients splenectomises pour un echec du RTX. Les populations lymphocytaires B residuelles ont ete caracterisees sur le plan phenotypique en cytometrie en flux, et leur programme transcriptionnel a ete etudie par RNAseq en cellule unique. Nous avons egalement etudie les capacites fonctionnelles de ces cellules in vitro ainsi que leur reactivite envers la GPIIbIIIa. Resultats Nous avons etudie les tissus spleniques de 16 patients en echec du RTX (delai de 1 a 6 mois apres la derniere injection). Des lymphocytes B residuels, majoritairement de phenotype memoire, etaient presents en nombre significatif chez la moitie d’entre eux. Ces cellules presentaient un phenotype atypique avec une expression reduite de l’immunoglobuline et des molecules de surface associees au BCR, ne repondaient pas a la stimulation par le BCR, mais proliferaient apres stimulation CD40L permettant d’identifier apres culture et differenciation in vitro une reactivite anti-GPIIbIIIa pour certaines d’entre elles. L’analyse transcriptionnelle par RNAseq en cellule unique des lymphocytes B memoires mettait en evidence un programme d’expression unique, different des patients non traites par le rituximab ou des donneurs d’organes. Ce programme etait principalement caracterise par la surexpression de genes anti-apoptotiques, la sous-expression de genes impliques dans l’identite lymphocytaire B, et l’expression de molecules de surface pouvant potentiellement permettre de developper de nouvelles cibles therapeutiques. Conclusion En conclusion, l’ensemble de ces donnees a mis en evidence que des lymphocytes B memoires avec un phenotype unique resistent au RTX et peuvent persister dans la rate plusieurs mois apres le traitement, contribuant ainsi aux rechutes observees a distance du RTX.